Стафилококки. Классификация. Свойства. Заболевания, вызываемые ими. Эпидемиология и патогенез. Иммунитет. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика и лечение.

Классификация стафилококков

• 17 группа по Берджи – грам-положительные кокки

• семейство Microсоссасеае

• род Staphylococcus

• виды:

– S. aureus

– S. epidermidis

– S. saprophyticus

Морфологические и тинкториальные свойства

n от лат. Staphylos (виноградная гроздь) + coccos (шар)

n Грамположительные

n Образуют микрокапсулу (только в организме человека)

n Неподвижны

n Спор не образуют

 

Культуральные свойства

• неприхотливы, могут расти на простых средах

• устойчивы к повышенному содержанию хлорида натрия и хорошо растут на средах с содержанием 5 - 15% NaCl

• среды:

– солевой, сахарный бульон

– молочно-солевой агар (МСА)

– желточно-солевой агар (ЖСА) (Чистовича)

– кровяной агар

• образуют непрозрачные, круглые, ровные колонии белого, жёлтого или золотистого цвета (образуют липохромные пигменты)

• на жидких средах – диффузный рост

Биохимические свойства

• каталазоположительны (отличие от стрептококков)

• по наличию плазмокоагулазы все стафилококки разделяют на две группы:

1. коагулазо-положительные: S. аureus

2. коагулазо-отрицательные: S. epidermidis и S. saprophyticus

• ферментируют многие углеводы с образованием кислоты

• S. aureus расщепляет маннит в анаэробных условиях

• восстанавливают нитраты в нитриты

• образуют H2S

• разлагают мочевину

• образуют лецитиназу

Заболевания, вызываемые стафилококками (более 100). S. Aureus:

гнойно-воспалительные заболевания кожи и подкожной жировой клетчатки, раневые инфекции, эндокардит, пневмония, артриты, остеомиелиты, перитонит, глазные инфекции, инфекции мочевыводящей системы, сепсис. синдром «ошпаренной кожи», пузырчатка новорождённых, синдром токсического шока, пищевые токсикоинфекции

Эпидемиология

• Источник инфекции

– человек (больной, носитель, может быть аутоинфекция)

• Пути передачи:

– воздушно-капельный, воздушно-пылевой

– контактный

– алиментарный

• Восприимчивый коллектив

– любой человек

Факторы патогенности стафилококков

• факторы адгезии и колонизации:

• микрокапсула

• тейхоевые кислоты

• белок А

• ферменты патогенности:

• гиалуронидаза (обусловливает высокую инвазивность)

• плазмокоагулаза (переводит протромбин в тромбин, который вызывает свертывание фибриногена, в результате чего каждая клетка покрывается белковой пленкой, защищающей от фагоцитов)

• фибринолизин

• лецитиназа (лецитовителлаза)

• ДНКаза и др.

• агрессины:

• микрокапсула

• тейхоевые кислоты

• белок А: связывается с Fc-участком антител, а значит молекулы IgG связываются с поверхностью бактериальных клеток в неправильной ориентации. Это приводит к нарушению опсонизации и фагоцитоза.

• токсины: экзотоксины

Токсины стафилококков

• Мембранотоксины (порообразующие):

a-токсин

действует на эритроциты, эндотелиоциты, полиморфноядерные лейкоциты, фибробласты, гепатоциты. При введении лабораторным животным вызывает кожные некротические реакции, после внутривенного введения - животное погибает через 3 – 5 минут;

b-токсин (сфингомиелиназа)

проявляет выраженные свойства холодового гемолизина (его активность максимальна при низкой температуре);

g-токсин

двухкомпонентный гемолизин с умеренной активностью в отношении эритроцитов человека;

δ-токсин

гемолизин

• Токсин синдрома токсического шока (TSST-1)

– действует за счёт стимулирования выделения ФНОα. Обладает вазотропным и нейротропным действием.

• Лейкоцидин

- избирательно разрушает лейкоциты (нейтрофилы)

• Энтеротоксины А, В, С, D, Е

- термостабильные низкомолекулярные белки, ответственны за развитие пищевых отравлений; механизм действия до конца не изучен.

• Эксфолиатины А и В

- вызывают разрушение десмосом зернистого слоя эпидермиса и отслойку рогового слоя эпидермиса

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Исследуемый материал

– определяется очагом поражения (гной, кровь, мокрота, смыв со слизистых, моча, фекалии и т. д.).

Методы диагностики:

1) Микроскопический метод

ориентировочный.

Наибольшую диагностическую ценность имеет при микроскопии материала из изначально стерильных полостей.

Видны граположительные кокки скоплениями в виде виноградных гроздей.

Бактериологический метод – основной

Материал засевают на:

– молочно-солевой агар (МСА)

• МПА

• 6,5% натрия хлорида

• 10% обезжиренного стерильного молока

При росте на МСА оценивают пигментообразование

– желточно-солевой агар (ЖСА) (Чистовича)

• МПА

• 10% натрия хлорида

• 15 - 20% желточной эмульсии (яичный желток взбивают в 150 - 200 мл стерильного физ. раствора).

При росте на ЖСА оценивают наличие радужного венчика вокруг колоний за счет фермента лецитовителлазы

– кровяной агар (КА)

При росте на кровяном агаре оценивают зону прозрачного гемолиза вокруг колоний

• Идентификация чистой культуры:

1) установление принадлежности выделенной культуры к семейству Micrococcaceae и роду Staphylococcus - тест на каталазу.

Каталаза – это фермент, который расщепляет перекись водорода на воду и кислород:

2H2O2 = 2H2O + O2.

При этом при добавлении H2O2 образуются пузырьки кислорода, что указывает на наличие каталазной активности.

2)Установление принадлежности чистой культуры к S. aureus требует постановки 2 тестов:

– тест на плазмокоагулазу

культуру стафилококка вносят в пробирку с 0,5 мл плазмы крови кролика, помещают в термостат при 37⁰С, через 3 часа пробирку вынимают, оставляют при комнатной температуре на 18 - 20 часов.

Реакция считается положительной независимо от степени свертывания плазмы - от небольшого сгустка, взвешенного в плазме, до полного неподвижного сгустка.

- ферментация маннита в анаэробных условиях

используют полужидкую среду Гисса с индикатором ВР, содержащую маннит. После посева заливают вазелиновым маслом.

В случае разложения маннита среда приобретает синий цвет по всему столбику агара.

ФАГОТИПИРОВАНИЕ S. aureus ПО МЕТОДУ ФИШЕРА

• Испытуемую культуру стафилококка засевают на МПА, затем делят чашку на 22 квадрата (22 типовых фага).

• В каждый квадрат наносят по одной капле различных типовых фагов.

• После суточной инкубации в термостате отмечают квадраты, в которых отмечается лизис бактерий.

• Фаготип бактериальной культуры определяется типом лизирующего ее фага.

Анатоксин стафилококковый адсорбированный

Вакцина стафило-протейно-синегнойная адсорбированная содержит:

• стафилококковый анатоксин,

• анатоксин синегнойной палочки,

• цитоплазматический АГ стафилококка,

• протейный АГ,

адсорбированные на гидроокиси алюминия.

Используется для профилактики.

Стафилококковый антифагин (вакцина стафилококковая лечебная) содержит комплекс растворимых термостабильных АГ, извлеченных из микробных клеток стафилококка водно-фенольной экстракцией.

Стафилококковая вакцина лечебная содержит взвесь инактивированных нагреванием клеток коагулазоположительных стафилококков

Антистафилококковый иммуноглобулин содержит антитела к стафилококковому экзотоксину. Получают от доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином, методом фракционирования по Кону.

Антистафилококковая плазма

• получают на станциях переливания крови от доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином.

• После проведенной иммунизации и появления в крови специфических антител в титре 6,0 — 10 МЕ/л донорам проводится плазмаферез.

• В ходе плазмафереза из организма извлекается порция крови, которая затем, в зависимости от метода, разделяется на плазму и форменные элементы, клетки крови возвращаются в организм, а удалённая плазма используется.