Бактериоскопический метод диагностики.

Бактериоскопический метод диагностики.

Бактериоскопический метод - метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на выявлении в исследуемом материале возбудителя и его идентификации по морфологическим и тинкториальным св-вам.

Условия применения метода:

◦ Наличие у возбудителя характерных морфологических и тинкториальных свойств;

◦ Характерная локализация в организме;

◦ Выделение возбудителя во внешнюю среду в больших кол-вах.

Достоинства метода:

◦ Быстрое получение результата;

◦ Низкая стоимость исследования;

◦ Возможно проведение исследования вне лаборатории (диагностика в кабинете врача).

Недостатки метода:

◦ Малая информативность;

· Морфологических и тинкториальных св-в недостаточно для идентификации подавляющего большинства возбудителей.

· Нет возможности определить чувствительность возбудителя к антимикробным препаратам.

· Нет возможности выявить источник инфекции, пути и факторы передачи возбудителя.

◦ Низкая чувствительность, низкая достоверность отрицательного результата;

· Возбудителя в исследуемом материале должно быть много. Если возбудитель не обнаружен - это не значит, что его нет.

◦ Субъективность.

· Результат зависит от уровня подготовки врача-микроскописта.

Заболевания: туберкулез, менингит, гонорея, сифилис, возвратный тиф.

 

Жгутики. Строение, функции, методы их выявления.

Жгутик состоит из трех основных частей:

◦ Ось с дисками в клеточной стенке и цитоплазматической мембране;

◦ Крюк;

◦ Длинный гибкий жгутик, состоящий из белка-флагеллина.

Вращение жгутика напоминает работу электромотора, в котором вместо электронов перемещаются протоны. Диски, расположенные в мембране играют роль подшипников, статора и ротора.

Протоны, поступающие к ротору за счет градиента протонов, заряжают ротор, вызывая его поворот на некоторый угол, и "проваливаются" внутрь клетки. Постоянная работа протонного двигателя приводит к быстрому вращению жгутика. Описывая конус, жгутик работает наподобие толкающего или тянущего винта.

Функция жгутиков - движение бактериальной клетки. В редких случаях жгутик может служить органом адгезии

Методы выявления: окраска по Морозову, электронная микроскопия.

 

Иммерсионный микроскоп. Принцип работы. Сфера применения.

Иммерсионный объектив (от лат. immersio — погружение) - между фронтальной линзой объектива и объектом находится иммерсионная среда:

◦ вода (n=1,33) - водная иммерсия;

◦ глицерин (n=1,43) - глицериновая иммерсия;

◦ иммерсионное масло (n=1,51) - масляная иммерсия.

Для исключения преломления света => уменьшается величина преломляющей способности

Сфера применения: изучение окрашенных микропрепаратов - (бактериологический метод диагностики)

Достоинства:

◦ Высокое разрешение;

◦ Простота настройки и использования.

Недостатки:

Необходимость фиксации и окраски препаратов.

Принцип действия:

Полезное увеличение x90. Имм. масло ↑апертуру объектива и разрешающую способность. Имеет коэффициент преломления как у предметного стекла 1.5, при этом Z = 0.2 мкм = 200 нм

 

Капсула, Строение, функции, методы выявления.

Капсула - слизистый слой, состоящий из кислых мукополисахаридов. Содержит большое количество связанной (гидратной) воды. Хорошо пропускает, но не задерживает водорастворимые вещества, в том числе красители.

Функции – адгезия, защита от фагоцитоза, вирулентность.

 

 

Иммунологические реакции и Окраска по Бурри-Гинсу:

Схема метода:

◦ Негативное контрастирование капсулы (по Бурри) - чёрная тушь (смешивается с исследуемой культурой и высушивается).

◦ Фиксация в пламени спиртовки.

◦ Окраска тел микробных клеток (по Гинсу) - водный фуксин 1 мин.

◦ Промывка – вода.

Принцип метода:

Капсула не воспринимает красители, поэтому её выявляют, создавая в препарате черный тушевый фон (метод Бурри). Дополнительная окраска тел а микробной клетки позволяет визуализировать капсулу (метод Бури-Гинса).

 

Основные группы микроорганизмов. Значение в патологии человека. Примеры.

1.Прокариота - организмы, не обладающие оформленным ядром и внутриклеточными мембранными структурами.

1.1. Собственно бактерии – наиболее обширная группа паразитических и свободно живущих прокариота, обладающих жесткой клеточной стенкой (брюшной тиф; сибирская язва; газовая гангрена).

1.2. Актиномицеты – бактерии способные к образованию длинных септированных или несептированных нитей (нитчатые бактерии) (актиномикоз).

Значение в патологии человека - многие актиномицеты используются в качестве штаммов-продуцентов при производстве антибиотиков и ферментных препаратов).

1.3. Микоплазмы – бактерии, не имеющие клеточной стенки (атипичная пневмония; урогенитальный микоплазмоз).

1.4. Риккетсии – бактерии, облигатные внутриклеточные паразиты (эпидемический сыпной тиф; клещевой риккетсиоз; пятнистая лихорадка скалистых гор; лихорадка цуцугамуши).

1.5. Хламидии – бактерии, облигатные внутриклеточные паразиты. Отличаются от риккетсий сложным циклом внутриклеточного размножения (трахома; хламидийная пневмония).

1.6. Спирохеты – спирально извитые микроорганизмы. Отличаются наличием внутриклеточных фибриллярных структур (сифилис;лептоспироз; боррелиоз Лайма).

2. Эукариота – организмы, обладающие оформленным ядром и внутриклеточными мембранными структурами.

2.1. Простейшие – одноклеточные эукариотические животные.

2.2. Низшие грибы – гетеротрофные одноклеточные и многоклеточные микроорганизмы.

3. Вирусы – неклеточная форма жизни.

 

Бактериоскопический метод диагностики.

Бактериоскопический метод - метод диагностики инфекционных заболеваний, основанный на выявлении в исследуемом материале возбудителя и его идентификации по морфологическим и тинкториальным св-вам.

Условия применения метода:

◦ Наличие у возбудителя характерных морфологических и тинкториальных свойств;

◦ Характерная локализация в организме;

◦ Выделение возбудителя во внешнюю среду в больших кол-вах.

Достоинства метода:

◦ Быстрое получение результата;

◦ Низкая стоимость исследования;

◦ Возможно проведение исследования вне лаборатории (диагностика в кабинете врача).

Недостатки метода:

◦ Малая информативность;

· Морфологических и тинкториальных св-в недостаточно для идентификации подавляющего большинства возбудителей.

· Нет возможности определить чувствительность возбудителя к антимикробным препаратам.

· Нет возможности выявить источник инфекции, пути и факторы передачи возбудителя.

◦ Низкая чувствительность, низкая достоверность отрицательного результата;

· Возбудителя в исследуемом материале должно быть много. Если возбудитель не обнаружен - это не значит, что его нет.

◦ Субъективность.

· Результат зависит от уровня подготовки врача-микроскописта.

Заболевания: туберкулез, менингит, гонорея, сифилис, возвратный тиф.