Асептика и антисептика при вымывании эмбрионов состоит из мероприятий.

1. Обмывание теплой водой с мылом наружных половых органов и корня хвоста, вытирание бумажными салфетками или ватными тампонами.

2. Стерилизация металлического катетера и переходника путем кипячения, обеззараживание латексного катетера в 96%-ном спирте, последующего промывания в фосфатно-буферной среде для трансплантации зародышей.

3. Влатексный катетер вставляют стерильный металлический стилет и фиксируют в замковом узле катетера. Предварительно стилет смазывают стерильным вазелиновым маслом.

4. Снаружи катетер также можно слегка смазать стерильным вазелиновым маслом, после чего его помещают в защитный стерильный полиэтиленовый чехол. Катетер в чехле вводят во влагалище и направляют в канал шейки матки. Придерживая инструмент в таком положении, сдвигают полиэтиленовый чехол назад, а катетер проводят через шейку матки и направляют в один из рогов матки. При этом металлический стилет вынимают 70

из катетера постепенно, по мере введения катетера в рог матки. Важно правильно разместить катетер в роге матки. Желательно, чтобы кончик катетера находился на расстоянии около 6 см от соединения яйцепровода с маткой.

5. Нагнетают воздух в баллончик в количестве 15-30 см3. как только баллончик будет наполнен воздухом, приступают к промыванию перекрытого (баллончиком) участка рога матки. Для этого полиэтиленовый шприц емкостью 50 мл с фосфатно-буферной средой присоединяют к катетеру вводят осторожно 30-35 мл среды. Затем шприц отсоединяют и жидкость из матки собирают в подготовительный стерильный сосуд; при этом открытый конец катетера оберегают от загрязнения. Опять присоединяют шприц и вводят столько же среды. Скаждым последующим введением количество среды увеличивают, доводят до 50-60 мл. Авсего для промывания рога матки используют 500 мл среды. Обычно пользуются несколькими шприцами, что при быстром заполнении и смене их значительно уменьшает затраты времени на промывание.

6. Когда будет завершено промывание одного рога матки, воздух из баллончика выпускают и катетер извлекают из половых путей. Другой подготовленный стерильный катетер вводят в другой рог матки, и всю процедуру повторяют заново.

7. После вымывания зародышей промывную жидкость помещают в термостат при t=37° или при комнатной t=25°Сдля оседания эмбрионов на дно, на 20-40 минут.

8. После верхний слой удаляют стерильным инструментом, а нижний слой объемом 100 мл разливают в 2-3 чашки Петри диаметром 100 мм, с расчерченным дном, на полосы шириной около 1 см для удобства поиска зародышей. Содержимое чашек просматривают под микроскопом (под 15-25-кратном увеличением). Обнаруженных эмбрионов переносят автоматической пипеткой в стерильную чашку Петри диаметром 40 мм с небольшим объемом физиологической среды. После чего оценивают качество эмбрионов.

Асептика и антисептика при трансплантации эмбрионов включает ряд мероприятий:

1. Животное-реципиент фиксируют в станке в манеже центра (пункта) трансплантации зародышей или в помещении непосредственно в стойле.

2. Наружные половые органы обмывают теплой водой и дезинфицируют 0,2%-ным раствором фурацилина, 2%-ным раствором диоцида или 70%-ным этиловым спиртом.

3. Подготовленный стерильный инструмент вводят во влагалище до шейки матки, сдвигают назад защитный полиэтиленовый 71

чехол и, пользуясь теми же приемами, что и при ректо-цервикальном способе осеменения, проводят его через канал шейки матки. После этого инструмент направляют в противоположный яичнику с желтым телом рог матки. Осторожными движениями руки через прямую кишку расправляют рог матки и натягивают его на инструмент так, чтобы кончик инструмента был ближе к верхушке рога матки. Удерживая инструмент в таком положении, оператор дает команду помощнику, который медленным надавливанием на стилет вводит зародыш с содержимым в матку.

4. Все манипуляции с введением инструмента в половые пути должны быть выполнены в течение 1,5-2 мин. Если затрачивают больше времени, то это может стимулировать сокращение матки и привести к изгнанию зародыша. Следует отметить, что с 6-го дня матка проявляет слабую сократительную функцию, но длительные манипуляции с ней могут стимулировать эту функцию. Приживаемость при нехирургической трансплантации свежеполученных зародышей составляет 50-60%, а при использовании сохраняемых в жидком азоте зародышей -40-45%.

5. На пунктах трансплантации эмбрионов должны соблюдаться все правила асептики и антисептики, санитарные нормы и требования к содержанию помещения и обработке животных, рук хирурга (акушера), используемого инструмента.