Реакция коагглютинации, латексаглютинации

Диагностикум представлен стафилококками для коагглютинации и частицыами латекса - для латексреакции, на поверхности которых находятся АТ (рис.4).

Рис. 4. Реакция коагглютинации.

В случае с фиксированными клетками стафилококка связывание АТ происходит за счет взаимодействия Fс-участками IgС с молекулами протеина А. При получении латексных диагностикумов используют химическое связывание АТ или АГ с полимерной основой частиц или взаимодействие, основанное на гидрофобных силах.

Достоинства: простота постановки.

Недостаток: возможность неспецифической агглютинации.

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ

Преципитация и агглютинация – это довольно сходные реакции, которые различаются главным образом на основании физических свойств АГ. В первом случае он представлен в растворимой, во втором – в корпускулрной формах. В основе РП лежит образование преципитата в процессе реакции АГ-АТ.

РП высоко специфична и чувствительна.

Ингредиенты реакции:

1) растворимый АГ или гаптен (преципититоген);

2) АТ-преципитины (иммунная преципитирующая сыворотка; получают иммунизацией кроликов соответствующими АГ);

3) изотонический раствор хлорида натрия или агаровый гель.

Методы постановки РП:

1. РП в растворах – реакция кольцепреципитации;

2. РП в геле

Реакция кольцепреципитации

Реакцию кольцепреципитации ставят в узких преципитационных пробирках, в которые разливают преципитирующие сыворотки. Затем наливают раствор преципитиногена. При положительной реакции на границе соприкосновения ингредиентов появляется мутное кольцо преципитации. Если в качестве антигенов в реакции кольцепреципитации используют прокипяченые и профильтрованные водные экстракты органов и тканей, то реакция носит название реакции термопреципитации по Асколи, применяемая для обнаружения термостабильных гаптенов возбудителей сибирской язвы и чумы (рис.5).

Одна из разновидностей РП в геле (реакция Оухтерлони) позволяет определять токсигенность дифтерийной палочки с помощью антитоксической сыворотки. В чашку Петри с питательной средой помещают полоску фильтровальной бумаги, пропитанной антитоксической противодифтерийной сывороткой и засевают исследуемыми культурами в виде штрихов, перпендикулярных к полоске бумаги. Инкубируют при 37°С в течение суток. При наличии токсигенной культуры в месте взаимодействия токсина с антитоксином образуются линии преципитации (рис.6).

Рис. 5. Реакция кольцепреципитации.

Рис. 6. Реакция преципитации в геле по Оухтерлони.

Реакция преципитации в геле носит название иммунодиффузии. Часто форезом в геле – иммуноэлектрофорез. Принцип метода: исследуемый антиген фракционируют электрофоретически, полученные фракции анализируют методом двойной диффузии при помощи антисыворотки.