Твердые вещества, являющиеся простыми соединениями или простыми смесями

(таблетки, капсулы, сахар, соли, остатки «неизвестного» порошка и др.)

 

Обработка пробы (100 мг.) этанолом (10мл.)

 

Фильтрование

 

Фильтрат Фильтрат

 

Обработка водой (10 мл.) Анализ экстракта подходящим

методом (ТСХ, ВЭЖХ, ГЖХ и др.)

Фильтрование

 

Анализ экстрактов подходящим методом

3.Жидкости с заметным содержанием биологического материала

(кровь, содержимое желудка, кишечника, чай, кофе, молоко, сиропы, супы).

 

Четырехкратное разбавление пробы водой, подкисление HCl (рН 2-3) и экстракция диэтиловым эфиром (V_о:V_В =10:1)

Экстракт Водный слой

Двухкратная реэкстракция Подщелачивание NH₄OH конц.

в насыщенный раствор экстракция хлороформом (V_о:V_в=4:1)

свежеприготовленного NaHCO₃

(V_о:V_в=1:1) Водный слой Хлороформный слой

(Отбрасывается)

Эфирный слой Водный слой Осушивание Na₂SO₄

безводным, фильтрование,

Осушивание Na₂SO₄ осторожное упаривание

безводным, фильтрование,

упаривание Подкисление HCl конц. Остаток 3

ухкратная экстракция (основные вещества)

Остаток 1 диэтиловым эфиром

(слабокислые и (V_о:V_в=2:1)

нейтральные вещества)

Осушивание Na₂SO₄

безводным, фильтрование,

упаривание

 

Остаток 2

(сильнокислые вещества)

 

Твердые вещества сложного смесевого состава

(цветы, хлеб, жиры, масла, биологические (мускулы, мозг, печень, почки) и растительные ткани)

 

Гомогенезация образца (100 г.) водой (10 мл.), подкисление HCl конц. (рН 2-3), добавление 50 мл. воды, насыщение твердым сульфатом аммония, нагревание на водяной бане 30 мин. и фильтрование

Фильтрат Остаток (отбрасывается)

 

Экстракция диэтиловым эфиром (V_о:V_в=1:1)

Экстракт Водный слой

 

Двухкратная реэкстракция в 10 мл Подщелачивание NH₄OH конц.

насыщенного свежеприготовленного экстракция хлороформом

раствора NaHCO₃ (V_о:V_в=4:1)

Экстракт Водный Водный слой Хлороформный

слой (отбрасывается) слой

 

 

Двухкратная реэкстракция Подкисление HCl конц., Осушивание

Na₂SO₄

в 10 мл. NaOH двухкратная экстракция безводным,

равным объемом диэтилового

эфира

Фильтрование упаривание

Эфирный слой Водный

слой

Осушивание Na₂SO₄ Водный слой Эфирный слой

безводным, (отбрасывается)

фильтрование, Осушивание Na₂SO₄

упаривание безводным,

Обработка упаривание

Остаток 1 Остаток 2 Остаток 3 Остаток 4

(нейтральные (слабокислые (сильнокислые (основные

вещества) вещества) вещества) вещества)

 

Метод Стаса – Отто

Гомогенизация биологического материала (100 г.)

трех – четырех кратная экстракция этанолом, подкисленным 10% раствором щавелевой кислоты (рН 2-3), по 24 час.

 

Фильтрование

Спиртовой фильтрат Остаток (отбрасывается)

 

Упаривание до сиропообразного состояния,

высаливание 96⁰ спиртом, фильтрование

(до отсутствия осадка)

 

Добавление 25 мл. горячей воды, фильтрование

 

Экстракция хлороформом (15, 10, 10 мл.)

Хлороформное извлечение Водное извлечение

 

Остаток 1 Добавление 25% аммиака (рН 10)

(вещества кислого,

нейтрального,

слабоосновного Экстракция хлороформом (15,10,10мл.)

характера)

 

Хлороформное извлечение Водное извлечение

(отбрасывается)

Остаток 2

(вещества основного характера)

 

Метод Валова

Биологический материал (кровь),

добавление раствора гидроксида натрия (рН 10)

 

Осаждение белков вольфраматом аммония

 

Центрифугирование

 

Добавление к центрифугату 10% раствора серной кислоты (рН 3-4)

 

Экстракция эфиром (15, 10, 10 мл.)

Эфирный слой Водный слой (отбрасывается)

 

Остаток 1 (вещества кислого характера)

Метод Крамаренко

Гомогенизация биологического материала (100 г),

трехкратная экстракция водой, подкисленной 0,02 н. раствором серной кислоты (рН 2-3) по 2, 1, 1 час

 

Процеживание

 

Центрифугирование

Центрифугат

При исследовании

загнившего При исследовании Ядовитые вещества

биологического свежего биологи- из кислых водных

материала ческого материала вытяжек

 

Добавление (NH₄)₂SO₄ Добавление 20% раствора NaOH (рН 4-5)

кристаллического

Экстракция хлороформом (15,10,10 мл)

Центрифугирование

Водный слой Хлороформный слой

К центрифугату добавление (отбрасывается)

10 % раствора серной кислоты Удаление хлороформа

(рН 2-3) (упаривание)

 

Экстракция эфиром (40, 40 мл) Добавление к сухому остатку

10 мл 0,1 н. HCl

Эфирный слой Водный слой

(отбрасывается) Остаток 2

(определение ядов из

Добавление 20% раствора кислых вытяжек)

гидроксида натрия (рН 9)

Экстракция хлороформом (15, 10, 10 мл)

Хлороформный слой Водный слой (отбрасывается)

Удаление хлороформа (упаривание)

 

Добавление к сухому остатку

10 мл 0,1 н. HCl (реэкстракция)

 

Остаток 1

(вещества основного

характера – алкалоиды)

 

 

Метод Васильевой

Гомогенизация биологического материала (100 г),

двухкратная экстракция водой (по 200 мл), подкисленной 10% раствором щавелевой кислоты (рН 2-3), по 2, 1 час.

 

Процеживание

 

Центрифугирование

Водный центрифугат Остаток (отбрасывается)

 

Экстракция хлороформом (15, 10, 10 мл)

 

Хлороформное извлечение Водное извлечение

 

Остаток 1 Добавление 25% аммиака (рН 10)

(вещества кислого, нейтрального,

слабоосновного характеров) Экстракция хлороформом (15,10,10мл)

Хлороформное извлечение Водное извлечение

(отбрасывается)

Остаток 2

(вещества основного характера)

 

Метод Грусц – Харди

Гомогенизация биологического материала (50 г),

добавление 5 мл HCl (рН 2) и кристаллического Na₂SO₄

безводного

 

Экстракция смесью спирт-хлороформ (1:1) 1 час.

 

Фильтрование через нуч -фильтр

Хлороформный слой Водно-спиртовой остаток

(отбрасывается)

Удаление хлороформа и спирта (упаривание, отгонка)

 

Растворение сухого остатка в горячей воде, фильтрование

 

Экстракция фильтрата хлороформом (15, 10, 10 мл)

Хлороформное извлечение Водное извлечение

(отбрасывается)

Остаток 1

(вещества кислого характера – бензонал, тиопентал, барбамил)

 

Метод Карташова

Гомогенизация биологического материала (5 г.), четырехкратная экстракция ацетоном (1 ступень) и ацетон-вода (5:3) (2-4 ступень)

по 5 мин.

Ацетоново -водные извлечения объединяют, добавляют K₂CO₃ кристаллический безводный (для высаливания ацетона)

Центрифугирование

 

Ацетоновый слой Водный слой (отбрасывается)

Упаривание

 

Добавление к сухому остатку 10 мл 0,1 н. HCl

Экстракция н-гексаном (10, 10 мл)

 

Водный слой Органический слой (отбрасывается)

 

Экстракция эфиром (10, 10 мл)

 

Эфирный слой Водный слой (отбрасывается)

 

Удаление (упаривание) эфира

 

Растворение сухого остатка в малом количестве хлороформа

 

Остаток ТСХ очистка на селикагеле

Метод Фартушного

 

Гомогенизация биологического материала (25 г) с 3 мл насыщенного раствора Na₂HPO₄

 

Экстракция диэтиловым эфиром (100, 100, 50 мл.) по 10 мин.

Эфирный слой Водный слой (отбрасывается)

 

Центрифугирование

 

Фильтрование

 

Остаток 1 (оксазепам)

Метод Саломатина

Гомогенизация биологического материала (100 г),

трехкратная экстракция этанолом,подкисленным 10% раствором щавелевой кислоты (рН 2-3)

Упаривание спиртовых вытяжек до густоты

 

Высаливание абсолютным этанолом

до исчезновения осадка белков

 

Фильтрование

Растворение остатка в горячей воде (60⁰С)

 

Охлаждение, фильтрование

Подкисление фильтрата до рН 2-3 насыщ. раствором

щавелевой кислоты

Экстракция эфиром (25, 25 мл)

 

Органический слой Водный слой (отбрасывается)

 

Добавление 50% раствора гидрооксида натрия (рН 13)

 

Экстракция эфиром (15 мл)

 

Органический слой Водный слой (отбрасывается)

Реэкстракция в 0,5 н. H₂SO₄ (10, 10, 10, 5, 5 мл)

 

Остаток 1 (фенотиазины)